ก่อนทำการผ่าตัดส่องกล้องต้องเตรียมสิ่งของดังนี้
1. ต้องมีการตรวจร่างกายก่อนการผ่าตัด ส่วนใหญ่รวมถึงการตรวจเลือด การทำงานของตับและไต ระบบการแข็งตัวของเลือด กรุ๊ปเลือด ไวรัส 8 รายการ ตรวจคลื่นไฟฟ้าหัวใจ เอกซเรย์ทรวงอก เอกซเรย์ช่องท้อง เป็นต้น หากทำการผ่าตัดมะเร็งลำไส้ใหญ่หรือทวารหนักผ่านกล้อง จำเป็นต้องมีการส่องกล้องระบบทางเดินอาหารและการตรวจอื่น ๆ หากทำการผ่าตัดมดลูกผ่านกล้อง จำเป็นต้องมีการตรวจ B-ultrasound ทางนรีเวชด้วย
2. ต้องมีการเตรียมลำไส้ก่อนการผ่าตัดผ่านกล้อง และต้องมีการสวนน้ำเกลืออุ่นๆ ในวันผ่าตัด
3. ก่อนทำการผ่าตัดผ่านกล้องจำเป็นต้องฆ่าเชื้อ เตรียมผิวหนัง และขูดขนบริเวณรักแร้หรือฝีเย็บออก
4. ต้องเตรียมเครื่องมือส่องกล้องระหว่างการผ่าตัด ได้แก่ แหล่งกำเนิดแสงเย็น จอมอนิเตอร์ เครื่องพ่นยา และอุปกรณ์ปฏิบัติการต่างๆ ที่จำเป็นสำหรับการผ่าตัดช่องท้อง
